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“假阴性”与“假阳性”结果如何判定?
2016-07-07 16:53
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假阴性判断:造成假阴性结果的原因有很多,主要体现在FAM扩增曲线不起来,原因包括标本抑制,核酸提取失败,基因突变以及仪器故障等。 目前国内主流PCR试剂都不带内标监控功能,用于检测目标基因的FAM扩增曲线既用来定量又用于定性(判断阴阳性),因此FAM扩增曲线的好坏非常关键。对于此类无内标试剂,建议结合乙肝血清标志物结果(五项定量/定性结果)来判断阴阳性,即使是FAM曲线有扩增也应该参考此结果,特别是E抗原结果。同时,对于拥有竞争性内标监控功能的试剂来说,可有以下四种情况发生:如FAM无扩增,内标有扩增:结果正常,判断该样本为阴性结果;如FAM无扩增,内标也无扩增:结果异常,可能原因核酸提取失败或有抑制,一定要重复实验;如FAM有扩增,内标有扩增:结果正常,因为待测核酸和内标在同一反应体系下扩增;如FAM有扩增,内标无扩增:结果正常,强阳性样本会抑制内标的扩增,导致内标结果偏弱或阴性。 假阳性判断(如何判定):临床PCR检测当中造成假阳性结果的情况比较少,原因包括试剂污染,气溶胶污染,操作污染,扩增产物污染,非特异性扩增,耗材污染等,所以建议一定要做阴性对照来监控是否存在污染。
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